激光共聚焦顯微鏡測(cè)試樣品的要求可以細(xì)分為生物樣品和材料樣品兩大類(lèi),具體要求如下:
生物樣品
熒光表達(dá)觀(guān)察:
樣品應(yīng)先在熒光顯微鏡下觀(guān)察熒光表達(dá)是否正常,以確定是否有必要使用激光共聚焦顯微鏡進(jìn)行進(jìn)一步分析。
蓋玻片厚度:
蓋玻片的厚度要求≤0.17mm,以確保測(cè)試的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。
激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng):
需要明確樣品的激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng),這是進(jìn)行激光共聚焦顯微鏡測(cè)試的關(guān)鍵參數(shù)。
掃描區(qū)域設(shè)置:
如果需要進(jìn)行重構(gòu),需要明確掃描區(qū)域的大小、位置和Z步進(jìn),這些參數(shù)會(huì)直接影響測(cè)試時(shí)間和結(jié)果的精度。
樣品固定:
樣品B須貼壁良好,不能懸浮起來(lái)。在載玻片上固定好樣品后,再送樣測(cè)試。
抗熒光淬滅劑:
進(jìn)行顯微成像時(shí),樣品需要加抗熒光淬滅劑,并且蓋玻片需要固定,以減少熒光信號(hào)的損失。
材料樣品
樣品制備:
材料樣品需要提前制備好,以滿(mǎn)足測(cè)試需求。
尺寸與平整度:
樣品尺寸沒(méi)有具體要求,但樣品B須平整,以確保測(cè)試的準(zhǔn)確性和圖像質(zhì)量。
成像范圍:
拍出來(lái)的圖像*大面積在1.11x1.8mm到5x5mm范圍內(nèi),顏色可調(diào),以滿(mǎn)足不同的測(cè)試需求。
其他注意事項(xiàng)
熒光染料選擇:如果同一樣品中有多種熒光染料,應(yīng)盡可能避免它們的發(fā)射波長(zhǎng)重疊,以防止交叉顏色問(wèn)題。
觀(guān)察模式:激光共聚焦顯微鏡通常配備多種觀(guān)察模式,應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的觀(guān)察模式。
操作環(huán)境:在操作過(guò)程中,應(yīng)保持顯微鏡和樣品的清潔,避免灰塵和雜質(zhì)對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響。
綜上所述,激光共聚焦顯微鏡測(cè)試樣品的要求涉及樣品的準(zhǔn)備、固定、激發(fā)與發(fā)射波長(zhǎng)的選擇、掃描區(qū)域的設(shè)置以及操作環(huán)境等多個(gè)方面。只有嚴(yán)格按照這些要求進(jìn)行操作,才能獲得準(zhǔn)確、可靠的測(cè)試結(jié)果。
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